更新時(shí)間：2025-11-22
| 中文名稱:人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299 | 英文名稱:HEL299 |
| 品牌: | 產(chǎn)地: 上海 |
| 保存條件: 無(wú)血清凍存液 | 純度規(guī)格: 99% |
| 產(chǎn)品類別: 細(xì)胞 細(xì)胞系 | |
| 貨號(hào): YS2175 | 用途范圍: 科研實(shí)驗(yàn) |
| 規(guī)格: T25 | 是否進(jìn)口: 是 |
| 組織來(lái)源: ATCC | 是否是腫瘤細(xì)胞: 咨詢客服 |
| 細(xì)胞形態(tài): 細(xì)胞系 | 生長(zhǎng)狀態(tài): 咨詢客服 |
| 器官來(lái)源: ATCC |
產(chǎn)品名稱：人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299
傳代方法 | 次建議1:2傳代 | 凍存條件 | 無(wú)血清凍存液（貨號(hào)：C7001） |
細(xì)胞描述 | 本庫(kù)的細(xì)胞僅用于科研工作，未經(jīng)許可不得用于其他目的，使用者不得將本庫(kù)細(xì)胞轉(zhuǎn)讓給第三者。 | ||
培養(yǎng)備注 | 用無(wú)菌離心管收集瓶子培養(yǎng)基，留作過(guò)渡培養(yǎng) | ||
人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299貨后處理
細(xì)胞在培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)至良好狀態(tài)后灌滿培養(yǎng)液并封好瓶口是細(xì)胞運(yùn)輸?shù)霓k法。收到細(xì)胞回到自己的實(shí)驗(yàn)室后，先打開(kāi)外包裝，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超凈臺(tái)內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作，培養(yǎng)箱靜置2-4小時(shí)。鏡下觀察：未超過(guò)80%匯合度時(shí)，可將瓶裝的培養(yǎng)液收集至離心管中，加入6ml培養(yǎng)基，放入37℃、5%CO2孵箱培養(yǎng)；超過(guò)80%匯合度時(shí)，根據(jù)情況傳代或者凍存，具體操作見(jiàn)細(xì)胞培養(yǎng)步驟。（注意發(fā)貨的是密封培養(yǎng)瓶的話，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)記得培養(yǎng)瓶蓋子擰松，傳代后建議一瓶用原瓶里面的培養(yǎng)基，另外一瓶用自己配的培養(yǎng)基）
人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299培養(yǎng)步驟
一、復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜（或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中），培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a）、對(duì)于貼壁細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞，脫落后吸出，在1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液，將細(xì)胞懸液按1：2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b）、對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM條件下離心8-10分鐘，棄上清液，補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二：可選擇半數(shù)換液方式，棄半數(shù)培養(yǎng)基后，將剩余細(xì)胞懸起，將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
PS：若客戶收到2ml小管細(xì)胞，收到細(xì)胞后，用75%酒精噴灑整個(gè)管子消毒后放到超凈臺(tái)或安全柜內(nèi)，嚴(yán)格無(wú)菌操作；將小管細(xì)胞轉(zhuǎn)移至T25培養(yǎng)瓶或6cm培養(yǎng)皿，加入5ml左右培養(yǎng)基混勻，放入培養(yǎng)箱過(guò)夜培養(yǎng)后查看細(xì)胞密度：若密度未超過(guò)80%，換液繼續(xù)培養(yǎng)，視情況傳代或者凍存。若密度超過(guò)80%，可直接進(jìn)行傳代（方法同上）。
三、細(xì)胞凍存：（注：無(wú)血清凍存液凍存細(xì)胞的方法請(qǐng)參考我司貨號(hào)：C7001）
1、細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí)，棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液，用PBS清洗細(xì)胞一次；
2、添加0.25%消化液約1ml至培養(yǎng)瓶中，倒置顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后加入培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打細(xì)胞使之脫落，然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中，1000rpm離心5min；
3、用適量的凍存液重懸細(xì)胞，并放置于凍存管中；
4、先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h，然后將其移入-80℃
人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299相關(guān)細(xì)胞如下：
YS2150RL1大鼠肺成纖維細(xì)胞RL1
YS2151REM大鼠胚肌細(xì)胞REM
YS2152RES大鼠胚皮膚成纖維細(xì)胞RES
YS2153PtK1袋鼠腎細(xì)胞PtK1
YS2154PtK2袋鼠腎細(xì)胞PtK2
YS2155DQSHS1迪慶綿羊皮膚成纖維細(xì)胞DQSHS1
YS2156Mv1lu貂肺上皮細(xì)胞Mv1lu
YS2157ACTK1非洲爪蟾腎細(xì)胞ACTK1
YS2158DogL1狗肺成纖維細(xì)胞DogL1
YS2159NRL2黑化大家鼠肺成纖維細(xì)胞NRL2
YS2160CatL2家貓肺成纖維細(xì)胞CatL2
YS2161CatS2家貓皮膚成纖維細(xì)胞CatS2
YS2162RabbitS1家兔皮膚成纖維細(xì)胞RabbitS1
YS2163RabbitK3家兔腎上皮細(xì)胞RabbitK3
YS2164GHS1金黃地鼠皮膚成纖維細(xì)胞GHS1
YS2165SheepL1綿羊肺成纖維細(xì)胞SheepL1
YS2166OA3Ts綿羊胚胎睪丸細(xì)胞OA3.Ts
YS2167JM人T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞JM
YS2168MT4人T細(xì)胞白血病細(xì)胞MT4
YS2169HFFF2人包皮成纖維細(xì)胞HFFF2
YS2170801D人大細(xì)胞肺癌細(xì)胞801D
YS2171SnuC1人結(jié)腸癌細(xì)胞SnuC1
YS2172H157人口腔鱗狀上皮癌細(xì)胞H157
YS2173H33HjA1人淋巴瘤細(xì)胞H33HjA1
YS2174K562AZQR人慢性骨髓性白血病細(xì)胞(耐藥株)K562AZQR
YS2175HEL299人胚肺成纖維細(xì)胞HEL299
YS2176HES人胚皮膚成纖維細(xì)胞HES
YS2177HH8人胚腎細(xì)胞HH8
YS2178HEH人胚心肌細(xì)胞HEH
YS2179SVCT人乳腺上皮細(xì)胞SVCT
YS2180KPNNS人腎上腺神經(jīng)母細(xì)胞瘤（腦轉(zhuǎn)移）KPNNS
YS2181FHC人小腸上皮細(xì)胞FHC
YS2182TSEFB樹(shù)鼩胚胎成纖維細(xì)胞TSEFB
YS2183GPL1豚鼠肺成纖維細(xì)胞GPL1
YS2184GPS5豚鼠皮膚成纖維細(xì)胞GPS5
YS2185GPH4豚鼠心肌細(xì)胞GPH4
YS2186KMML1小白鼠肺成纖維細(xì)胞KMML1
YS2187Sarcoma180小鼠腹水瘤細(xì)胞Sarcoma180
YS2188FO小鼠骨髓瘤細(xì)胞FO
YS2189GC2spd小鼠精母細(xì)胞GC2spd
YS2190P388D1小鼠淋巴樣瘤細(xì)胞P388D1
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